肉的宰后嫩化最主要的归因于肌原仟维框架的严重破坏，肌原仟维框架是由内源性球核淀粉酶酶质球核淀粉酶酶质水解表现酶可溶解肌原仟维和组织血生殖癌内部骨架球核淀粉酶酶质产生的。与二十多年来一直以来都是点赞中心点的钙球核淀粉酶酶质酶不一样的，胱天球核淀粉酶酶质酶（caspases）这几天成为了感好感的时候题。胱天球核淀粉酶酶质酶在组织血生殖癌内部凋亡的实施分阶段起着至关重心的工作能力，各举caspase-3在去逝球核淀粉酶酶质球核淀粉酶酶质水解表现中的工作能力是各个面和复杂化的，以至于应当进1步论述。S-亚硝基化能够 自动调钙尽情释放、体力排泄、球核淀粉酶酶质质可溶解和组织血生殖癌内部凋亡来自动调色泽，属于嫩度和持水工作能力。中后期论述出现S-亚硝基化还可以调整依赖社会关系线粒体的caspase-3级联表现，这有机会是身体肌肉组织血生殖癌内部凋亡和羊肉茶叶品质变迁的其原因。caspase-3的论述重心是其与组织血生殖癌内部凋亡的社会关系，只不过，极少有论述浅论S-亚硝基化自动调caspase-3的逻辑。

2024年9月由合肥渔业综合大学张万刚专家教授公司在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生态学为该研究提供了亚硝基化掩盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

汉语副标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

杂志期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2025年反应要素：5.7

刊登时段：2024年9月

投资者公司：南京农业大学

研究方案原材料：蛋白

拜谱给予技術：亚硝基化修饰组学

水平风格：

一、实验結果

01.Caspase-3活力性

现在尚不清NO对caspase-3的限定制用需不需要归因于NO介导的S-亚硝基化，不相同酸度等度的GSNO看做外源性NO销售，以成脂caspase-3的身体外S-亚硝基化。最后发现，与是没有GSNO的组比起来，100、200和400μM GSNO组的caspase-3可溶性同质性调低（图1），与事先报道范文保持一致。GSNO治理调低caspase-3可溶性的未知愿意仍存在不足阐述。

图1 其他溶液浓度的GSNO治理对caspase-3活力性的直接影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化情况

科研Caspase-3的亚硝基化层次，以体现了GSNO对Caspase-3的的反应性。经GSNO处置后，加测到caspase-3蛋白质S-亚硝基化抗拉强度扩大（图2）。此类结论体现了，外源性GSNO培训可顺利完成引诱caspase-3的身体S-亚硝基化。令人感动特别的是，在还没有GSNO存在着的对比组中加测到同一个忽闪的S-亚硝基化带，这体现了caspase-3可能突发内源性的S-亚硝基化。除外，本科研中caspase-3的S-亚硝基化层次较高，而caspase-3的灵活性下降，这与之间的科研不一。因此，caspase-3的特情人S-亚硝基化装饰位点尚不看不清楚，还必须要进1步的探索世界。

图2 GSNO治疗对caspase-3S-亚硝基化总体水平的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化突显组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码编码序列。黄色箭头的编码编码序列说明S-亚硝基化肽，颜色箭头的C说明S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3可降解结球蛋白

结核淀粉酶做另一种主要的神经组织细胞骨架核淀粉酶，在恢复肌神经组织细胞空间结构的的空间结构的详细其中，完成性和紧缩性方位起着主要用处，探讨S-亚硝基化caspase-3对结核淀粉酶可生物降解的过敏性更具主要积极意义。与Std（未用胱天核淀粉酶酶-3和GSNO孵育的初使肌植物合成纤维核淀粉酶）组对比，0 μM GSNO组（肌原植物合成纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的详细完成结核淀粉酶分量取得减少，温馨提示caspase-3对结核淀粉酶更具自身的核淀粉酶淀粉酶酶质水解力量。在GSNO孵育后，详细完成结核淀粉酶的分量显著的提升（P < 0.05）。不仅，当GSNO氧浓度偏高时，详细完成结核淀粉酶的分量持续性调涨（P < 0.05）（图5）。该出现 证明，SNO掩盖的caspase-3以横向依赖于的玩法控制结核淀粉酶的可生物降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结血清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3光降解肌钙蛋清-T

肌钙蛋清酶-T (TnT)是原肌球蛋清酶调试主要负责身体肌肉伸缩的丝条的须要肌原合成黏胶氯纶蛋清酶。TnT的挥发症状是测试到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化经济条件下，caspase-3对TnT的挥发状态下图6一样，与Std组（含有caspase-3和GSNO的肌原合成黏胶氯纶）不同之处，caspase-3组中30 kDa TnT电影段落有分明提升，反映出caspase-3积极参与了TnT的挥发，除此以外，caspase-3与GSNO的孵育产生30 kDa TnT下跌。在100和200 μM GSNO组中是没有测试到分明的区别(P > 0.05)，而当GSNO的氧浓度符合400 μM 时，该电影段落有分明减掉(P < 0.05)。这一些看见反映出了SNO呈现的caspase-3对TnT挥发的克生产用。结蛋清酶和TnT是caspase-3的皮肤敏感底物，而GSNO整理消减caspase-3的抗逆性应该产生肌原合成黏胶氯纶蛋清酶挥发程度上消减。综合上面的所论，NO促进的S-亚硝基化能够 根据呈现半胱氨酸残基来调试caspase-3的抗逆性，接着进一歩印象其对结蛋清酶和TnT的蛋清酶油脂水解作用，进而印象鸡肉品质质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3吸附肌钙淀粉酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本研究致力于研究S-亚硝基化对caspase-3淡化的的会影响和随即对牛羊肉肌原植物仟维身体外可降解的的会影响。血清酶S-亚硝基化能能淡化caspase-3的半胱氨酸残基，可以造成 caspase-3生物较低，进步骤减缓了其对牛羊肉肌原植物仟维血清酶的血清酶淀粉水解意识。

三、拜谱总结

科学探讨采取了酶活测定方法，亚硝基化装饰组学探讨，WB等检侧的手段，感觉血清S-亚硝基化行装饰caspase-3的半胱氨酸残基，这导至了caspase-3活力的降低，齐头并进一歩调节作用了其对牛羊肉肌原合成纤维血清的血清核氨基酸水解效果。本科学探讨为解释清楚血清质亚硝基化对色泽的调节作用规则能提供了一大个新的第三视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、突显血清质组学、排泄组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸类型食品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺硝化作用、total氧化物备份、解离巯基，欢迎大家咨询！

参考选取论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663